Em meu laboratório utilizamos um protocolo para o preparo de TE ligeiramente diferente do protocolo fornecido. Qual devo seguir?
De fato, recomendamos que os oligos sejam ressuspendidos em TE (10 mM Tris, 0.1 mM EDTA, pH 8.0) e não em TE (10 mM Tris, 1 mM EDTA, pH 8.0), que é o utilizado na maioria das reações tamponadas com esse buffer. Isso porque, se por um lado o TE ajuda a manter o pH da solução constante e a prevenir a digestão do oligo por DNAses, por outro lado, o TE pode causar inibição da PCR devido à ação quelante do EDTA, caso esse reagente esteja em alta concentração. Assim chegamos a essa fórmula que irá proteger seus oligos e não irá inibir sua PCR. Cabe lembrar que a diluição da solução estoque para a concentração de trabalho deve sempre ser feita em água pura livre de DNAses.